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        H7亞型禽流感抗體檢測試劑盒 (競爭ELISA,雞、鴨、鵝等禽類通用)




        產品編號:


        檢測方法:競爭ELisa


        檢測樣品:血清


        規格:96T/192T





          

        H7亞型禽流感抗體檢測試劑盒 (競爭ELISA,雞、鴨、鵝等禽類通用)




        介紹

        H7亞型禽流感抗體檢測試劑盒檢測家禽、野禽等動物血清中的H7亞型禽流感抗體,用于評估禽流感疫苗免疫狀況及感染禽類的血清學輔助診斷。

        本試劑盒采用競爭ELISA法,在酶標板條微孔上預包被H7抗原,運用抗單克隆抗體與血清中的抗體競爭固相載體中的結合位點,從而間接檢測血清中的抗H7抗體。在試驗中,加入待檢血清及抗單克隆抗體,經過溫育后,若樣品中含有H7病毒特異性抗體,則與包被板上的抗原結合,從而阻礙了單抗與抗原的結合,經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后,再加入抗小鼠酶標二抗,與檢測板上的抗原抗體復合物發生特異性結合,再經洗滌除去未結合的酶結合物;在微孔中加入TMB底物顯色,樣本的吸光度值與其所含有的抗體的含量成負相關,從而達到檢測樣品中抗體的目的。

         

        組份

        1

        抗原預包被板條

        1/2

        7

        樣本稀釋液

        20ml

        2

        酶結合物

        11/21ml

        8

        陰性對照

        200μl

        3

        單抗工作液

        7/14ml

        9

        陽性對照

        200μl

        4

        10倍濃縮洗滌液

        100ml

        10

        封板膜

        2/4

        5

        顯色液

        11/21ml

        11

        說明書

        1

        6

        終止液

        15ml




        需自備的設備及試劑

        1. 微量移液器: 0.5μl-10μl、10μl-100μl、100μl-1000μl。

        2. 一次性移液器吸頭。

        3. 量筒:500ml。

        4. 96孔板酶標儀。

        5. 蒸餾水或去離子水。

        6. 洗瓶或洗板機。

        樣品制備

        取動物全血,按常規方法制備血清,要求血清清亮,無溶血。

        洗滌液的準備

        濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫,如有鹽結晶,搖動使結晶的鹽溶解,然后用蒸餾水或去離子水作10倍稀釋。稀釋好的洗滌液可在4℃存放一周左右。

        注意事項

        1. 試劑盒使用前各試劑應平衡至室溫,使用前應搖勻,使用后放回2-8℃。

        2. 不同品種、不同批號試劑盒的試劑組分不得混用,使用試劑時應防止試劑污染。

        3. 顯色液和終止液對皮膚和眼可能有刺激性,使用時應該注意防護。

        4. 顯色液不要暴露于強光和避免接觸氧化劑。

        5. 檢測板拆封后應避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中,并盡快置于2-8)。

        6. 所有廢棄物在丟棄之前應合理處理以免污染。

        7. 嚴格遵守操作說明可以獲得最好的結果。操作過程中移液、定時和洗滌等的全部過程必須精確。

        操作步驟

        1. 取預包被的檢測板(根據樣品多少,可拆開分次使用),待檢驗板條每孔均需加入樣本稀釋液40ul,然后將待檢血清10μl加入檢測板,同時設陰性2孔和陽性對照1孔,取陰性及陽性對照各10μl分別加入反應孔中;

        2. 在樣本以及陰陽性對照混勻后,每孔加入50μl單抗工作液。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出)。

        3. 蓋上封板膜,置37℃溫育60分鐘。

        4. 小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,用洗滌液洗6次。每次用洗滌液注滿板孔(約250μl),且每次需將洗滌液甩干。洗滌6次后在干凈吸水紙上拍干。

        5. 每孔加酶結合物100μl,蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。

        6. 小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗滌6方法同4。切記最后在干凈吸水紙上拍干。

        7. 每孔顯色液100ul,蓋上封板膜37℃閉光顯色15分鐘。

        8. 每孔加終止液50μl,使反應終止,10分鐘內測定結果。

        結果判定

        用酶標儀于450nm630nm作參比波長)讀取吸光度OD值。

        試驗成立的條件是:

        陰性對照(NOD均值>0.5;

        陽性對照(POD/陰性對照(NOD均值 < 0.4。

        計算方法:

        樣品OD/陰性對照OD均值=S/N值。

        陰陽性判斷:

        S/N≥0.35則判斷為陰性;

        S/N<0.35則判斷為陽性。

        有效期

        貯存方法: 2 - 8oC下貯存。

        有效期: 12個月。

         


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